
AF546 WGA、AF568 WGA、AF594 WGA 是指分别用 Alexa Fluor 546、568、594 荧光染料标记的 麦胚凝集素(Wheat Germ Agglutinin, WGA)。它们是广泛用于细胞膜糖生物学研究、神经示踪、组织成像及病原体-宿主相互作用分析的荧光探针。
WGA(Wheat Germ Agglutinin):
一种从麦胚中提取的植物凝集素(lectin),可特异性识别细胞表面糖缀合物中的 N-乙酰葡糖胺(GlcNAc)和 唾液酸(Neu5Ac)残基,广泛分布于质膜、高尔基体、溶酶体及细菌/真菌细胞壁。
Alexa Fluor染料(AF546 / AF568 / AF594):
由 Thermo Fisher Scientific 开发的磺化罗丹明类荧光染料,具有高亮度、光稳定性和水溶性,适用于多色成像。
共性
展开剩余83%糖结合特异性:高亲和力结合 GlcNAcβ1-4GlcNAc(几丁质片段)和末端唾液酸化糖链
膜标记能力:快速、均匀地标记活细胞或固定细胞的质膜,无需透化
高荧光性能:摩尔消光系数 >70,000 M⁻¹cm⁻¹量子产率高(Φ ≈ 0.7-0.9)抗光漂白性强于 FITC/TRITC
水溶性好:磺酸基防止聚集,适用于生理缓冲液
低细胞毒性:可用于活细胞短期成像(<1 小时)
二、应用特点1. 细胞膜轮廓标记
作为质膜通用染色剂,用于:
细胞形态观察
共定位分析(如与 GFP 融合蛋白)
细胞边界分割(图像分析)
2. 神经科学研究
逆行/顺行神经示踪:WGA 可被神经元内吞并沿轴突运输;
常用于脑图谱绘制(如注射到特定核团后追踪投射)。
3. 糖生物学与病原体研究
检测细胞表面 GlcNAc/唾液酸表达变化(如癌变、病毒感染);
标记细菌(如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌)或真菌细胞壁。
4. 多色免疫荧光
与 DAPI(核)、Alexa Fluor 488(绿色抗体)、Cy5(远红)组合,实现四色以上成像;
AF568/594 因光谱分离度好,常用于高plex实验。
5. 冷冻/石蜡切片染色
适用于固定组织的糖结构可视化(如肾小管、肠上皮)。
三、共同优势这三种试剂在性能上具有高度的一致性,主要优势如下:
高亮度与光稳定性:Alexa Fluor 系列染料具有极高的荧光量子产率和优异的抗光漂白性能,适合长时间成像和强光照射的实验。
低自荧光:相较于传统的罗丹明(Rhodamine)或 FITC,这些 Alexa Fluor 染料的自荧光更低,背景噪声更小,信噪比更高。
高纯度与生物相容性:陕西新研博美提供的这些试剂纯度均在 95% 以上,且专为科研用途设计,经过严格的生物相容性验证。
多色兼容性强:由于覆盖了从 546 到 594 的波长段,研究者可以根据实验需求(如是否需要使用 488nm 激光通道)灵活选择不同颜色的 WGA 进行标记,而不影响其他通道的使用。
总体比较与选择建议
如果你的显微镜配置有 594 nm 激光:建议优先选择 AF594 WGA,它的发射波长最红,信号最强,且光谱与 488nm 或 647nm 通道几乎没有重叠,适合高质量的多色成像。
如果你想利用 561 nm 激光:AF546 WGA 和 AF568 WGA 都是不错的选择。AF546 发射波长更短(橙红色),可能与 DAPI(蓝色)或 FITC(绿色)更容易区分;AF568 发射波长更长(红色),适合在 DAPI 和 AF488 之后的通道。
如果你的实验需要进行信号放大(TSA 技术),则需要额外购买对应的 Tyramide试剂。
四、关联试剂DBCO-PEG4-NHS ester
BCN-PEG3-amine
Azido-PEG5-COOH
Alkyne-PEG8-Malemide
TCO-PEG12-biotin
Cyclopropene-PEG3-NHS
THPTA(铜配体)
BTTAA(铜配体)
Me-Tetrazine-COOH
DiPy-Tetrazine-amine
Tz-PEG2-OH
NHS-PEG11-azide
Fmoc-NH-PEG4-Boc
Tos-PEG10-Tos
109635-64-5
DBCO-NHCO-PEG4-NH-Boc
1255942-12-1
Propargyl-PEG10-t-butyl ester
2055022-22-3
Propargyl-PEG10-acid
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